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试验探针原理的应用及使用方法、注意事项
点击次数:1222 发布时间:2019-02-20 返回
     试验探针原理的应用及使用方法、注意事项
  生物样品往往是非常复杂的生物分子混合体,除少数特殊样品外,一般不能直接与芯片反应,必须将样品进行生物处理,试验探针的原理也是根据这些做成的。
  首先,必须把我们所需要的细胞、颗粒从混和细胞中分离出来。现在主要利用电场作用来分离细胞、细菌及颗粒(包括富集病毒以及破碎细胞使核酸和蛋白质释放出来)。其中比较成熟的分离方法有介电电泳。
  其原理是:在不均匀的变换频率(在10~100kHz范围内)的交流电场中,不同细胞或颗粒由于介电性质不同而在交变电场中形成流过速度的差别,使某一类细胞或细菌(包括病毒)得到富集,从而达到分离各种颗粒的目的。
  其次,分离后的细胞或颗粒用电脉冲或其他的方法进行细胞溶解。溶解后的混和液用蛋白酶等进行处理,除去蛋白质。由于细胞中的DNA/mRNA等的含量较少,为了提高基因芯片的灵敏度,我们必须对分离出来的DNA/mRNA进行扩增。目前的扩增方法主要是PCR扩增。
  后,为了获得基因的杂交信号必须对目的基因进行标记。标记方法有荧光标记法、生物素标记法、同位素标记法等。常用的有以下几种方法制备和标记探针:将纯化的样品RNA通过特定的引物逆转录合成试验探针,在合成的过程中掺入标记物;或者先将待测样品的RNA转录合成cDNA,再进一步通过加入标记物进行体外转录合成cRNA单链探针,又或者将合成的cDNA加标记物和特殊引物进行PCR扩增,制备成标记的双链探针。
  试验探针的使用方法:
  先用20N插座保护门试验探针依次三个方向施加在保护门的不利的位置,同一位置三个方向施加20N的力约5秒钟,探针金属部分不能触及带插座电部件。
  注意:操作期间不能旋转探针,当探针从一个方向变动到另一个方向时,不施加力,但不能拔出探针。
  然后用1N插座保护门试验探针以三个方向施加1N的力。每个方向约5秒钟,探针金属部分不能触及带插座电部件。
  注意:本次试验需独立碰触,每一次碰触后都要拔出探针。
  试验探针的注意事项:
  请不要轻易调整推力,如需调整,请使用分辨精度至少为0.033N仪器对1N探针进行校准。
  由于试验探棒较为精密机械产品,使用时请轻拿轻放,妥善保管。
  试验探针的金属部分(95w18Cr4V-HRC70)会生锈,注意保养防护。
  以上便是今天关于试验探针原理的应用及使用方法、注意事项的全部分享了,希望对大家今后使用本设备能有帮助。
  
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